T/FSSJ SYNY001—2020 黑木耳液体菌种生产技术规程-团体标准

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标准详细信息
标准状态  现行
标准编号  T/FSSJ SYNY001—2020
中文标题  黑木耳液体菌种生产技术规程
英文标题  Production Technical Practice for Liquid Spawn of Auricularia auricula
国际标准分类号  65.020.01 农业和林业综合
中国标准分类号  
国民经济分类  A014 蔬菜、食用菌及园艺作物种植
发布日期  2020年01月20日
实施日期  2020年01月20日
起草人  邹存兵、赵铠、朱巍巍、张忠伟、陈飞、黄云松、李莹莹、孙凯、刘东旭、刘 芳岑、盛金、王俊超
起草单位  辽宁三友农业生物科技有限公司、辽宁省微生物科学研究院、辽宁省食用菌协会
范围  本标准规定了黑木耳液体菌种生产的基本要求,主要包括生产场地、厂房和布局、设施设备、生产工艺流程、质量要求、技术要求、生产记录与存档、菌种贮藏。 本标准适用于黑木耳液体菌种的生产。
主要技术内容  生产工艺流程
母种→摇瓶液体种
 ↓
培养料配制→投料→灭菌→冷却→接种→培养→发酵罐液体种
 培养基
母种培养基使用附录A中A.1规定的马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)或A.2规定的综合马铃薯葡萄糖
琼脂培养基(CPDA)。
液体种培养基根据黑木耳品种及当地原料的要求使用适宜配方(见附录B),严格掌握初始pH。 8 母种
母种继代培养后须按NY/T 1846 规定抽样,并进行感官检验和菌丝微观特征检验,合格菌种进入生
产流程。母种质量要求符合GB 19169及NY/T 1742 关于母种质量的规定。
 摇瓶液体菌种生产
1 培养基分装及灭菌
摇瓶液体种培养基装量为容器体积的1/4至1/3,分装后立即灭菌。按常规高压蒸汽灭菌锅操作规程,
0.1Mpa~0.12Mpa(121℃~126℃),维持25min。
灭菌后的摇瓶液体种培养基于30℃±1℃ 培养箱恒温培养48小时后,观察确认无混浊、无异味,可
用于接种培养。
2 接种
按无菌操作规程,将母种斜面菌丝体切割成2mm~4mm颗粒,移入摇瓶培养基中,每100 mL液体培养
基接种菌丝体颗粒1颗~3颗。
3 培养
菌种培养温度26℃±1℃,空气相对湿度55%~65%,避光振荡培养。往复式摇床振荡频率60次~120
次/分, 旋转式摇床振荡频率150转~180转/分。每日检查生长状态,及时检出浑浊、异味、泡沫异常
的不合格菌种。
摇瓶静置1分钟后,菌丝球体积占比液体培养基体积的4/5以上,可结束培养。
 发酵罐液体菌种生产
1 空气过滤系统检查
使用前要拆分检查滤芯,要求无油污、料污、无破损,外壳内外壁要求无污物、光亮洁净。
滤芯在额定风量下,对粒径0.1~0.2μm粒子的过滤效率大于99.99%,空气阻力低于280pa。
2 发酵罐检查与清洗
检查罐上全部阀门、安全阀、压力表、要求完好,工作正常。对罐体内、外和全部阀门用流水进行
冲洗,达到无死角、内壁无任何培养料残余物的洁净程度。
3 空消灭菌
发酵罐初次使用、出现染菌、长期放置及更换品种时,应进行空消灭菌。有内置电加热棒的培养器
加水至容积的80%加热至121℃,维持40min。用外源蒸汽灭菌的培养器,蒸汽压力达到0.1Mpa~0.12Mpa
(121℃~124℃),维持40min。
4 投料定容
将配制好的培养基材料搅拌均匀,倒入或用泵抽入发酵罐中,加水定容至所需体积。培养基投料总
量为罐体总容积的70%~80%。
5 灭菌和冷却
按高压蒸汽灭菌方法操作,培养器内压力达到0.1Mpa~0.12Mpa,培养基温度达到121℃~124℃、
保持时间60 min~90 min。
灭菌结束将培养基降温至24℃~28℃。降温过程中要及时向培养器内补充过滤空气,防止罐压回零。
6 接种
利用火焰保护接种,接种量为罐内培养基总量的0.1%~0.5%。
7 培养
发酵罐通风量每分钟1:0.5~1.2 V/V(料液体积/空气体积),调节罐压保持在0.02 Mpa~0.04 
Mpa,培养温度调节在24℃~26℃,培养7d~10d可达到香菇液体菌种成品标准。特殊品种根据特殊需求
具体设定。
8 检测和判定
培养开始3d后每日从发酵罐中取出样品进行检测。按照NY/T 1846 中菌丝微观特征、细菌霉菌检验
方法检验,如异常则排空罐内培养物,空消,重新生产。
发酵终 pH 4.5-5.5,每100ml液体菌种菌丝干离心后重量2.0~2.8g/100ml。合格黑木耳液体菌种
球状菌丝体呈白色,滤液呈淡黄色。菌液稍粘稠,有大量球状菌丝体悬浮、分布均匀、菌球浓白清晰,
有黑木耳液体菌种培养时特有的香气,无异味。
9 贮藏
成品液体菌种应及时应用。
特殊情况下,培养结束后在发酵罐内通入无菌空气,保持罐压0.02Mpa~0.04Mpa,环境温度6℃~
10℃,可保存24h。
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团体详细信息
团体名称辽宁省食用菌协会
登记证号512100003186535383发证机关辽宁省民政厅
业务范围组织会员开展交流、合作、培训等活动,加强行业自律与规范,研究、探讨新技术。
法定代表人/负责人赵凯
依托单位名称
通讯地址沈阳市大东区辽沈二街76-2号5门邮编 : 113113

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