T/ZJZYC 003—2021 铁皮石斛种苗生产技术规程-团体标准

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标准详细信息
标准状态  现行
标准编号  T/ZJZYC 003—2021
中文标题  铁皮石斛种苗生产技术规程
英文标题  Technical regulations for plantlets reproduction of Dendrobium officinale
国际标准分类号  65.020.01 农业和林业综合
中国标准分类号  CCS B 05
国民经济分类  A017 中药材种植
发布日期  2021年11月18日
实施日期  2021年12月18日
起草人  毛碧增、张亚惠、钱亦纯、何伯伟、王松琳、叶梓
起草单位  浙江大学、浙江省中药材产业协会、浙江省农业技术推广中心
范围  本文件规定了铁皮石斛种苗的术语和定义、种苗生产、质量要求、包装、标志、运输与贮存、田间管理等要求。 本文件适用于铁皮石斛种苗生产
主要技术内容  4 种苗生产
留种
原植物应符合《中国高等植物图谱》收载的兰科植物铁皮石斛(又名黑节草Dendrobium officinale Kimura et Migo )的植物特征,经过鉴定确认或品种审定。选用适合当地栽培环境的优质、高产、抗病、抗逆性好的种源。留种地应具有良好的物理隔离措施或方圆1000m内无其它种类石斛。留种株应该选择品种特性纯正、生长健壮的植株。
4.2 实生苗培育
4.2.1 制种
盛花期,取同一株系内生活力最强的花药和柱头,进行授粉。母本在授粉后立即摘除唇瓣,及时挂牌标志。授粉后,蒴果开始转黄时,采收饱满、成熟的果实。
4.2.2 蒴果播种
将采收的蒴果经无菌水清洗后置于超净工作台,75%乙醇浸泡1 min后,无菌水冲洗表面3次~5次。然后用浓度为1.0%~1.5%的NaClO浸泡20 min,并不停摇晃,用无菌水冲洗5次~6次,使无异味,无菌滤纸吸干水后,用无菌剪刀在蒴果顶部剪一缺口,轻轻抖动,将蒴果内的种子均匀撒在种子萌发培养基上MS+椰子汁100 ml/L~200 ml/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L,pH 5.6~5.8。 
4.2.3 继代培养
待幼苗长到1 mm~3 mm时,转接到继代培养基MS+6-BA0.5 mg/L~1.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L,pH 5.6~5.8,进行继代培养。
4.2.4 生根培养
待幼苗长至1.0 cm~1.5 cm高时,转接到生根培养基1/2 MS+香蕉100 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂 8 g/L,pH 5.6~5.8,进行生根培养。
4.3 无性系培育
4.3.1 外植体消毒
切取带芽的长1.0 cm~2.0 cm的茎段,无菌水清洗后置于超净工作台,用75%乙醇浸泡1 min,无菌水冲洗表面3次~5次,然后用浓度为1.0%~1.5%的NaClO浸泡,加1~2滴Tween-20,并不断摇动,8 min~10 min后用无菌水冲洗5次~8次,用无菌滤纸吸干水分。
4.3.2 不定芽诱导和增殖
切取带芽的长0.5 cm~1.0 cm的茎段,接种到不定芽诱导培养基MS+椰汁150 ml/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L,pH 5.6。待长出不定芽后,接种到不定芽增殖培养基MS+6-BA1.0 mg/L~1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L,pH 5.6~5.8。
不定芽继代控制在6代~8代。
4.3.3 原球茎诱导、增殖和分化
剥取5 mm左右带分生组织的茎尖,接种到原球茎诱导培养基上MS+6-BA1.5 mg/L~2.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+土豆 100 g/L+蔗糖 30 g/L+琼脂 8 g/L,pH 5.6~5.8。
将原球茎接种到原球茎增殖培养基上MS + 6-BA 0.5 mg/L + NAA 1.5 mg/L+土豆 50 g/L+蔗糖 30 g/L,pH 5.6~5.8。
将原球茎接种到原球茎分化培养基上MS + 6-BA1.5 mg/L + NAA 0.5 mg/L+蔗糖 30 g/L+琼脂 8 g/L,pH 5.6~5.8。
原球茎继代控制在6代~8代。
4.3.4 生根培养
待幼苗长至1.0 cm~1.5 cm高时,转接到生根培养基1/2 MS+香蕉100 g/L+蔗糖 30 g/L+琼脂 8 g/L,pH 5.6~5.8,进行生根培养。
4.4 培养条件
光照强度30 μmol·m-2·s-1~60 μmol·m-2·s-1,白天温度25℃±2℃,晚上温度22℃±2℃(黑暗培养)。每天照光12 h~14 h。
5  质量要求
组培瓶苗的质量等级指标、检验方法、检验规则参见附录A。
6  包装、标志、运输与贮存
6.1 包装标志
组培瓶苗宜用塑料箱或纸板箱包装。包装箱内附种苗出厂(圃)合格证,外面应注明实生苗或原球茎诱导苗、数量、出苗日期、批号、标准号、生产单位的地址和联系电话,和其他按GB/T 191的规定执行。
6.2 运输
运输过程中应控温,温度以22℃~25℃为宜。
6.3 贮存
组培瓶苗常温弱光照条件下可以贮存7 d~10 d。
7  田间管理
田间管理按照 DB33/T635-2015 执行。
是否包含专利信息  
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团体详细信息
团体名称浙江省中药材产业协会
登记证号513300005018770621发证机关浙江省民政厅
业务范围行业调研协调、标准规范制定、技术信息咨询
法定代表人/负责人何伯伟
依托单位名称
通讯地址杭州市凤起东路29号邮编 : 310020

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