T/CQAAS 007—2023 花椒麻味物质含量的测定-液相色谱质谱法-团体标准
目录
| 标准详细信息 | |
|---|---|
| 标准状态 | 现行 |
| 标准编号 | T/CQAAS 007—2023 |
| 中文标题 | 花椒麻味物质含量的测定-液相色谱质谱法 |
| 英文标题 | |
| 国际标准分类号 | 01.020 |
| 中国标准分类号 | |
| 国民经济分类 | A019 其他农业 |
| 发布日期 | 2023年12月07日 |
| 实施日期 | 2024年01月01日 |
| 起草人 | 程玥啨、张义刚、谢永红、曾维友、范烨、苏家奎、池浩、周於强、童建川、赵海忠、杨仕春、刘瑜涵、陈秀强、李剑 |
| 起草单位 | 重庆市农业科学院果树研究所、重庆市江津区农产品质量安全中心、重庆市江津区花椒产业协会、重庆市江津区花椒加工业协会、重庆市江津先锋花椒城有限公司、重庆蓓廷农业科技有限公司 |
| 范围 | |
| 主要技术内容 | 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 花椒制品 花椒经粉碎、萃取、冷冻等工艺生产的产品。主要包括花椒粉、花椒油、保鲜花椒、花椒油树脂等以花椒为原料加工的产品。 3.2 花椒酰胺 花椒呈麻味的主要成分，含有羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素和羟基-ε-山椒素等多种酰胺类成分。 4 原理 花椒麻味物质主要包括羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素和羟基-ε-山椒素等多种酰胺类组分，试样中的花椒酰胺类组分经甲醇提取后，通过C18液相色谱柱的分离，采用 SHIMADZU LC-MS8050 系统对色谱分离得到的物质进行识别和确认，利用270nm处紫外检测峰面积外标法对花椒麻味物质进行测定。色选机基本要求 5 试剂材料与仪器设备 5.1 试剂材料 5.1.1 甲醇：色谱纯。 5.1.2 乙腈：色谱纯。 5.1.3 冰醋酸：分析纯。 5.1.4 水：纯净水。 5.1.5 羟基--α-山椒素标准品：纯度大于95%。 5.1.6 微孔滤膜：孔径0.2um有机相滤膜。 5.2 仪器设备 5.2.1 液相色谱-三重四级杆质谱联用仪：LCMS8050日本SHIMADZU公司。 5.2.2 色谱柱：Shim-pack GISTC18 柱（2.1×50mm,2μm） 5.2.3 超声波清洗机：SB-4200 DTD 型宁波新芝生物科技有限公司。 5.2.4 分析天平：感量0.0001g。 5.2.5 高速粉碎机：转速≥10000rpm。 5.2.6 高速离心机：≥4500rpm。 6 仪器参考条件 6.1 色谱条件 采用 SHIMADZU Shim-pack GIST C18（2.1 ×50mm, 2μm）色谱柱，流动相甲醇（A）-0.2%醋酸（B）二元高压梯度洗脱，SPD-M20A 检测器，检测波长为 254nm，流速为0.4mL/min，柱温为 40℃。 6.2 质谱条件 采用 SHIMADZU LC-MS8050 系统对色谱分离得到的物质进行识别和确认。所有数据采集和处理步骤均采用 Labsolution 工作站进行。 7 实验步骤 7.1 标准溶液的配制 准确称取羟基-α-山椒素10mg（精确至0.01mg），用甲醇溶解并转移至10mL棕色容量瓶中，定容至刻度，摇匀，即得每1mL 含1mg 羟基-α-山椒素的对照品储备溶液；准确吸取上述储备溶液1mL置10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，即得每1mL含0.1mg羟基-α-山椒素对照品使用溶液（现配现用）。用色谱级甲醇稀释制成浓度为5 μg/mL、10 μg/mL、20 μg/mL、30 μg/mL、40 μg/mL、50 μg/mL的对照品工作溶液。可根据仪器灵敏度适当调整浓度范围。 7.2 样品液制备 7.2.1 干花椒 取混合均匀的花椒粒100 g，用高速粉碎机粉碎后过20目筛，混匀。称取1 g（精确至0.0001 g）粉碎混匀后的样品置于具塞烧瓶中，加甲醇50 mL，超声萃取0.5 h，冷却至室温，转移至100 mL容瓶，甲醇定容，移取上清液10 mL于50 mL容量瓶定容，经0.2 μm滤膜过滤，待测。 7.2.2 鲜花椒 取混合均匀的鲜花椒粒200g。经组织捣碎机捣碎后，称取5 g(精确至0.000 1 g）粉碎混匀后的样品置于具塞烧瓶中，加甲醇50 mL，超声萃取0.5 h，冷却至室温，转移至100 mL容瓶，甲醇定容，移取上清液10 mL于50 mL容量瓶定容，经0.2 μm滤膜，待测。 7.2.3 花椒粉 称取1 g(精确至0.000 1 g）粉碎混匀后的样品置于具塞烧瓶中，加甲醇50 mL，超声萃取0.5 h，冷却至室温，转移至100 mL容瓶，甲醇定容，经0.22μm滤膜过滤，待测。 7.2.4 花椒油 花椒油摇匀，精密称取0.2 g（精确至0.0001 g）置于具塞烧瓶中，加甲醇50 mL，超声萃取0.5 h，冷却至室温，转移至100 mL容瓶，甲醇定容，0.22μm滤膜过滤，待测。 7.2.5 花椒油树脂 取膏状或固体花椒油树脂样品置于50 ℃水浴锅中溶解，摇匀。精密称取0.2 g（精确至0.0001 g）样品置于烧杯中，加甲醇50 mL，超声萃取0.5 h，冷却至室温，转移至100 mL容瓶，甲醇定容，经0.2μm滤膜过滤，待测。 7.3 样品测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μL,注入液相色谱质谱仪，按6.1、6.2仪器设备测定条件进行测定，即得花椒酰胺类麻味物质的保留时间和相应的质谱特征响应峰面积。由样品液的花椒酰胺类物质的特征峰面积，从标准曲线上查出相应的羟基-α-山椒素浓度。样品液的响应值应在仪器测定的线性范围之内，超出线性范围的供试样品液需用甲醇稀释后测定。 7.4 结果计算 供试品中花椒麻酰胺类麻味物质含量以羟基-α-山椒素计，按公式（1）计算。 ……………………………….（1） 式中： X——供试品中花椒酰胺类麻味物质含量，单位为毫克每克（mg/g）； C——供试品溶液中花椒麻素的峰面积对应的质量浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； V——供试样品工作液定容体积，单位为毫升（mL）； K——供试样品工作液稀释倍数； m——供试品的称样量，单位为克（g）； 结果保留小数点后 2 位。 7.5 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%。 |
| 是否包含专利信息 | 否 |
| 标准文本 | 查看 |
| 团体详细信息 | |||
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| 团体名称 | 重庆市农学会 | ||
| 登记证号 | 51500000450417997P | 发证机关 | 重庆市民政局 |
| 业务范围 | 学术交流、咨询服务、培训人员 | ||
| 法定代表人/负责人 | 许明陆 | ||
| 依托单位名称 | |||
| 通讯地址 | 重庆市九龙坡区白市驿镇高峰寺村（农科大道重庆市农业科学院科研综合大楼2-13房间） | 邮编 : 401329 | |