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| 标准详细信息 |
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| 标准状态 | 现行 |
| 标准编号 | T/YNANT 08—2024 |
| 中文标题 | 禽流感病毒H5、H7、H9亚型多重实时荧光定量RT-qPCR检测方法 |
| 英文标题 | Multiplex real-time fluorescence quantitative RT-PCR detection method for H5, H7, and H9 subtypes of avian influenza virus |
| 国际标准分类号 | 11.220 |
| 中国标准分类号 | |
| 国民经济分类 | M745 质检技术服务 |
| 发布日期 | 2024年02月06日 |
| 实施日期 | 2024年02月16日 |
| 起草人 | 信爱国、元正菊、李珂、段博芳、孙敏华、向斌、常志顺、陈丽英、赵蓉、严红亚。 |
| 起草单位 | 云南省畜牧兽医科学院、云南省动物疫病预防控制中心、广东省农业科学院动物卫生研究所、云南农业大学动物医学院。 |
| 范围 | 本文件规定了禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）H5、H7、H9亚型多重实时荧光定量RT-qPCR检测的试剂与材料、仪器与设备、实验前准备、操作步骤、结果判定等内容。
本文件适用于家禽及野禽的组织、鸡胚尿囊液、排泄物、分泌物及环境样品中禽流感病毒M基因、H5、H7、H9亚型的核酸检测。 |
| 主要技术内容 | 根据禽流感病毒共有基因特定的序列，合成一对特异性引物和一条特异性的荧光双标记探针。探针的5＇端和3＇端分别标记不同的荧光素，如5＇端标记 FAM 荧光素，它发出的荧光能够被检测仪器接收，称为报告荧光基团(用 R 表示)，3＇端一般标记 TAMRA 荧光素，它在近距离内能吸收5＇端报告荧光基团发出的荧光信号，称为淬灭荧光基团（用Q表示）。
当 PCR 反应在退火阶段时，一对引物和一条探针同时与目的基因片段结合，此时探针上R基团发出的荧光信号被Q基团所吸收，仪器检测不到R所发出的荧光信号；当PCR反应进行到延伸阶段时，Taq酶在引物的引导下，以四种核苷酸为底物，根据碱基配对的原则，沿着模板链合成新链；当链的延伸进行到探面结合部位时，受到探针的阻碍而无法继续，此时的Taq酶将探针水解成单核昔酸，消除阻碍，与此同时标记在探针上的R基团游离出来被检测仪所接收；在Taq酶的作用下继续延伸过程合成完整的新链，R和Q基团均游离于溶液中，仪器可继续检测到R所发出的荧光信号。 |
| 是否包含专利信息 | 否 |
| 标准文本 | 不公开 |
| 团体详细信息 |
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| 团体名称 | 云南省实用新技术协会 |
| 登记证号 | 51530000518359798B | 发证机关 | 云南省民政厅 |
| 业务范围 | 学术交流、推广应用 |
| 法定代表人/负责人 | 毛定群 |
| 依托单位名称 | |
| 通讯地址 | 昆明高新区商院路百大国际派A座2711 | 邮编 : 650000 |
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