T_SDAHA 003—2024 兽药制剂用柏麻提取物-团体标准
目录
| 标准详细信息 | |
|---|---|
| 标准状态 | 现行 |
| 标准编号 | T/SDAHA 003—2024 |
| 中文标题 | 兽药制剂用柏麻提取物 |
| 英文标题 | |
| 国际标准分类号 | 11.220 |
| 中国标准分类号 | |
| 国民经济分类 | A011 谷物种植 |
| 发布日期 | 2024年08月19日 |
| 实施日期 | 2024年09月18日 |
| 起草人 | 侯云峰、滕力庆、聂婧、丁雪莹、张立杰、刘超、于森 |
| 起草单位 | 山东金铸基药业有限公司、山东辰陇生物技术有限公司、山东裕城生物技术有限公司、山东广元药业科技有限公司 |
| 范围 | |
| 主要技术内容 | 1 性状 取样品约2.0 g，于表面皿中，在自然光下观察。累计观察山东金铸基药业有限公司公示生产样品 3批次，结果见表2。 表2 柏麻提取物形状观察结果汇总表 生产企业 批号 性状 山东金铸基药业有限公司 20231201 棕黄色膏状体 山东金铸基药业有限公司 20231202 棕黄色膏状体 山东金铸基药业有限公司 20231203 棕褐色膏状体 根据观察结果确定产品性状为：棕黄色至棕褐色膏状体。 2 盐酸小檗碱鉴别 按照《兽药质量标准》（2017版）中药卷柏麻口服液【鉴别】（1），柏麻口服液【鉴别】（1）项中取样量为50 mL，相当于中间产品柏麻提取物25g，确定取样量为25g ±2.5g。 按标准中给出的方法：加硅藻土研匀，80℃烘干，加甲醇适量，置水浴加热回流 15 分钟，滤过，滤液浓缩至 5mL，作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录 0502）试验，吸取上述两种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7:1:3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 对山东金铸基药业有限公司生产的3批产品进行了薄层色谱鉴别，结果见图1。 图1 盐酸小檗碱薄层鉴别 根据检测薄层色谱图，确定该方法适用于该产品盐酸小檗碱鉴别。 3 盐酸麻黄碱鉴别 按照《兽药质量标准》（2017版）中药卷柏麻口服液【鉴别】（2），柏麻口服液【鉴别】（2）项中取样量为50mL，相当于中间产品柏麻提取物25g，确定取样量为25g±2.5g。 按标准中给出的方法：加浓氨试液 1mL使成碱性，用乙醚乙醇 (8:2混合液提取2次，每次10 mL，合并提取液，并用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加甲醇 1mL使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每 1mL含 5mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录 0502) 试验，吸取上述两种溶液各 5uL，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以正丁醇-冰酷酸-水(8:2:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.5%茚三酮丙酮溶液，在 105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 对山东金铸基药业有限公司生产的3批产品进行了薄层色谱鉴别，结果见图 2。 图2 盐酸麻黄碱薄层鉴别 根据检测薄层色谱图，确定该方法适用于该产品盐酸麻黄碱鉴别。 4 大青叶鉴别 按照《中华人民共和国兽药典》二部柏麻口服液【鉴别】（3），柏麻口服液【鉴别】（3）项中取样量为50mL，相当于中间产品柏麻提取物25g，确定柏麻提取物取样量为25g±2.5g。。 按标准中给出的方法：浓缩至近干，残渣加乙醇 20 mL使解，滤过，滤液浓缩至1 mL，作为供试品溶液。另取大青叶对照药材 1 g，加乙醚 20 mL，置水浴上加热回流 1小时，滤过，弃去滤液，滤渣加70%乙醇 20 mL，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇 1 mL使溶解，作为对照药材溶液照薄层色谱法(附录 0502) 试验，吸取上述两种溶液 5uL，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以正丁醇-无水乙醇-浓氨试液-水(8:8:1:3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在 105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 对山东金铸基药业有限公司生产的3批产品进行了薄层色谱鉴别，结果见图3。 图3 大青叶薄层鉴别 根据检测薄层色谱图，确定该方法适用于该产品大青叶的鉴别。 5 相对密度 按照《中华人民共和国兽药典》二部附录0601相对密度测定法（比重瓶法）中的规定执行。具体数据见下方表3，结果检测数据均在此范围。 表3 柏麻提取物相对密度结果汇总表 批号 相对密度 平均值 RSD（%） 20231201 1.15 1.16 1.15 1.16 0.71 1.15 1.16 1.17 20231202 1.17 1.16 1.17 1.17 0.76 1.18 1.18 1.16 20231203 1.19 1.20 1.18 1.19 0.75 1.20 1.18 1.19 批间均一性（x?） 1.17 1.39（n=18） 实验结果表明相对密度的平均值为1.17，批内均一性、批间均一性均符合要求，说明本品工艺稳定。确定柏麻提取物的相对密度为1.15~1.20。 6 pH值 按照《中华人民共和国兽药典》二部 附录 0631 pH值测定法中的规定执行。具体数据见下方表4，结果检测数据均在此范围。 表4 柏麻提取物pH值结果汇总表 批号 pH值 平均值 RSD（%） 20231201 4.87 4.85 4.88 4.86 0.67 4.84 4.81 4.90 20231202 4.91 4.92 4.88 4.89 0.47 4.89 4.87 4.86 20231203 5.01 5.00 5.04 5.15 0.65 5.02 5.05 5.09 批间均一性（x?） 4.93 1.71（n=18） 根据三批平行样结果的平均值为4.93，结合最终柏麻口服液的pH值范围，最终确定柏麻提取物的pH值应为4.5~5.6。 7 盐酸麻黄碱含量测定 按照《兽药质量标准》2017年版 中药卷 柏麻口服液并无含量测定，为保证产品质量，因此对麻黄进行含量控制。我们对《中华人民共和国兽药典》以及《兽药质量标准》2017版中涉及麻黄含量检测的液相方法进行汇总和实验，最终确定一个适合的液相含量测定方法。方法如下。 取本品约2.5 g，精密称定，加浓氨试液1 mL使成碱性，用乙醚-乙醇混合溶液提取 2次，每次10 mL，合并提取液，无水硫酸钠脱水，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加甲醇使溶解转移至25 mL量瓶中，分析洗涤，最后加甲醇至刻度，摇匀。精密量取2 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。 因此为保证产品质量，我们进行了多批实验室小试验证，确定含量每1 g提取物中含麻黄以盐酸麻黄碱（ C10H15NO·HCl ）计，≥ 0.10 mg。在此指标要求下产品质量稳定，实验结果见表5。 表5 柏麻提取物盐酸麻黄碱含量测定结果汇总表 批号 盐酸麻黄碱，mg/g 平均值 RSD（%） 20231201 0.147 0.145 0.145 0.15 0.84 0.147 0.145 0.144 20231202 0.145 0.144 0.144 0.15 0.52 0.146 0.145 0.145 20231203 0.146 0.147 0.147 0.14 0.79 0.148 0.149 0.146 批间均一性（x?） 0.15 0.98（n=18） 三批样品中盐酸麻黄碱的含量平均值为0.15 mg/g。实验结果表明，批内均一性、批间均一性均符合要求，证明本品工艺稳定。考虑到实验室间检测误差、工艺条件等因素，含量标准在平均值的基础上下调至80%左右，定为盐酸麻黄碱含量不得少于 0.10 mg/g。 分析方法验证：本标准试验方法参照并引用了《中华人民共和国兽药典》二部柏麻口服液以及《兽药质量标准》（2017版）中药卷柏麻口服液。因此参照《中华人民共和国兽药典》一部 附录9101 兽药质量标准分析方法验证指导原则进行分析方法验证，证实此方法适用兽药制剂用柏麻提取物的相应检测要求。 7.1.准确度 在规定范围内，取同一浓度（相当于100%浓度水平）的供试品，向已知被测成分含量的供试品中再精密加入一定量的已知纯度的被测成分对照品，依法测定。用实测值与供试品中含有量之差，除以加入对照品量计算回收率。用6份样品的测定结果进行评价，回收率在在90%~108%之间，实验结果见表6。 表6 柏麻提取物准确度实验结果 序号 已知含量（mg） 测得量 加标量（mg） 回收率（%） 平均回收率（%） RSD （mg） （%） 1 0.091 0.214 0.125 100.93 100.54 0.19 2 0.091 0.215 0.125 100.47 3 0.091 0.215 0.125 100.47 4 0.091 0.215 0.125 100.47 5 0.091 0.215 0.125 100.47 6 0.091 0.215 0.125 100.47 实验结果表明，平均回收率为100.54%，回收率RSD为0.19%，小于2%，方法可对盐酸麻黄碱含量进行准确测定。 7.2.精密度 7.2.1.重复性 在规定的测试条件下，同一份均匀供试品，经同一分析人员使用同一分析设备6次取样测定所得结果之间的相对标准偏差（RSD）不得过1.0%，实验结果见表7。 表7 柏麻提取物重复性实验结果 样品 1 2 3 4 5 6 含量，mg/g 0.186 0.187 0.187 0.187 0.187 0.186 平均含量，mg/g 0.186 RSD，% 0.28 实验结果表明，重复性结果RSD为0.28%，小于1.0%，无显著差异，方法重复性良好。 7.2.2.重现性 在规定的测试条件下，同一供试样品在不同实验室由不同分析人员测定结果之间的精密度，相对标准偏差（RSD）不得过1.0%，实验结果见表8。 表8 柏麻提取物重现性实验结果 样品 1 2 3 4 5 6 含量，mg/g 0.183 0.181 0.185 0.184 0.185 0.182 平均含量，mg/g 0.18 RSD，% 0.89 实验结果表明，重现性结果RSD为0.89%，小于1.0%，无显著差异，方法重现性良好。 7.3.专属性 在规定的测试条件下，取溶剂、对照品溶液、供试品溶液分别进样检测，溶剂峰不干扰盐酸麻黄碱峰的检测，实验结果见表9. 表9 柏麻提取物专属性实验结果 溶液名称 溶剂 对照品溶液 供试品溶液 盐酸麻黄碱峰 保留时间（min） —— 17.901 17.919 供试品溶液盐酸麻黄碱峰保留时间与对照品溶液盐酸麻黄碱峰保留时间一致。方法对柏麻提取物中盐酸麻黄碱含量的检测具有专属性。 7.4.线性与范围 在规定范围内，分别制备5份不同浓度的盐酸麻黄碱对照品溶液进行测定，以测得的响应值对被测物的浓度进行作图，实验结果见表10。 表10 柏麻提取物线性实验结果 溶液名称 浓度（μg/mL） 峰面积1 峰面积2 峰面积平均值 线性溶液1 45.8 123038 110627 116832.5 线性溶液2 91.6 208897 205852 207374.5 线性溶液3 229 501781 498809 500295 线性溶液4 458 998813 1008046 1003429.5 线性溶液5 916 1990827 1990475 1990651 线性方程 y=2178.478x+0.67 相关系数r 0.999826 实验结果呈线性关系，在测试浓度的20%~400%范围内，盐酸麻黄碱浓度与峰面积线性关系良好。 根据分析方法验证结果，试验方法适用于柏麻提取物的含量测定。 8 贮存条件和有效期 8.1 贮存条件，按照《中华人民共和国兽药典》对提取物贮存的要求，确定该产品贮存条件为冷藏保存。 8.2 有效期，在满足规定的贮存和运输条件下，产品有效期由生产企业自行规定。 |
| 是否包含专利信息 | 否 |
| 标准文本 | 查看 |
| 团体详细信息 | |||
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| 团体名称 | 山东省动物保健品协会 | ||
| 登记证号 | 51370000MJD600658C | 发证机关 | 山东省民政厅 |
| 业务范围 | 协调会员关系；建议自律机制；组织行业会议、会展、培训、考察、推介、鉴定等相关活动；承接政府有关部门委托事项。 | ||
| 法定代表人/负责人 | 张连秀 | ||
| 依托单位名称 | |||
| 通讯地址 | 山东省济南市槐荫区经十路243330号军泰大厦6层D617室 | 邮编 : 250022 | |