T_CGTA 03—2024 发芽糙米中γ-氨基丁酸的测定 高效液相色谱-串联质谱法-团体标准
目录
| 标准详细信息 | |
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| 标准状态 | 现行 |
| 标准编号 | T/CGTA 03—2024 |
| 中文标题 | 发芽糙米中γ-氨基丁酸的测定 高效液相色谱-串联质谱法 |
| 英文标题 | Determination of γ—aminobutyric acid in germinated brown rice by high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry method |
| 国际标准分类号 | 67.060 |
| 中国标准分类号 | X11 |
| 国民经济分类 | M745 质检技术服务 |
| 发布日期 | 2024年09月20日 |
| 实施日期 | 2024年11月20日 |
| 起草人 | 陈克明、陈幸莺、钟鹏鹏、龚浩如、许艳霞、李志坚、林树化、张瑶、陈立忠、葛胜修、谭莉、邓晓庆、陈旭霞、周希福、黄能文。 |
| 起草单位 | 陈克明食品股份有限公司、辽宁寨香生态农业股份有限公司、长沙尚海农业科技股份有限公司、湖南诺千健康管理有限公司、湖南省粮油产品质量监测中心、湖南省农产品加工研究所。 |
| 范围 | 本文件规定了高效液相色谱—串联质谱法测定发芽糙米中γ—氨基丁酸的术语和定义、原理、试剂与材料、仪器与设备、试样制备与保存、分析步骤、结果计算、精密度及其他的要求。 本文件适用于发芽糙米中γ—氨基丁酸含量的测定。 |
| 主要技术内容 | 4 原理 试样经甲酸水溶液提取γ—氨基丁酸，用高效液相色谱-串联质谱法测定，外标法定量。 5 试剂与材料 除非另有规定，使用试剂均为色谱纯。水为GB/T 6682 中规定的一级水。 5.1 试剂 5.1.1 甲醇（CH3OH）。 5.1.2 甲酸（HCOOH）。 5.2 试剂配制 5.2.1 0.1 % 甲酸水溶液：准确吸取1.00 mL 的甲酸（5.1.2）用水定容至1000 mL。 5.2.2 甲醇+0.1 % 甲酸水溶液=1+9 （V+V）：取100 mL甲醇（5.1.1）和900 mL 0.1 % 甲酸水（5.2.1）溶液混合，用滤膜（0.22 μm，有机相）过滤后备用。 5.3 标准品 γ—氨基丁酸标准品（CAS号：56-12-2）：纯度≥99 % 或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。 5.4 标准溶液配制 5.4.1 γ—氨基丁酸标准储备溶液：准确称取γ—氨基丁酸标准品（5.3）10.0 mg（精确至0.0001 g），用水溶解并定容至10 mL，此溶液浓度为1 mg/mL。储存于4 ℃冰箱中，有效期3个月。 5.4.2 γ—氨基丁酸标准系列工作溶液：将γ—氨基丁酸标准储备溶液（5.4.1）用0.1 % 甲酸水溶液（5.2.1）配制成2 μg/mL标准中间液，再稀释成10 ng/mL、20 ng/mL、40 ng/mL、80 ng/mL、160 ng/mL、400 ng/mL标准系列工作溶液，临用时配制。 6 仪器与设备 6.1 液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。 6.2 分析天平：感量为0.0001 g。 6.3 超声波清洗器。 6.4 漩涡混匀器。 6.5 离心机：转速≥6000 r/min。 7 试样制备与保存 样品混匀后，取200 g 样品经四分法缩分至约50 g，研磨至全部通过孔径0.25 mm（60目）筛的试样，装入密封的容器中，室温下保存。 8 分析步骤 8.1 提取 称取0.5 g 样品（7）（精确至0.0001 g）于50 mL 离心管中，加入10 mL 0.1 %甲酸水溶液（5.2.1），30 ℃ 超声提取30 min 后在漩涡混匀器（6.4）上涡旋2 min，于6000 r/min 离心5 min，将上清液转入25 mL 容量瓶中，样品残渣再用10 mL 的0.1 % 甲酸水溶液（5.2.1）重复上述提取步骤提取一次，合并2 次提取液，用0.1 % 甲酸水溶液（5.2.1）定容至25 mL，摇匀备用。根据需要用0.1 %甲酸水溶液（5.2.1）稀释至标准曲线线性范围内，混匀，经微孔滤膜（0.22 μm）过滤待测。 8.2 仪器参考条件 8.2.1 液相色谱条件 a) 色谱柱：C18 色谱柱（2.1×150 mm，1.7 μm），或性能相当者； b) 流动相：甲醇+0.1 % 甲酸水溶液=1+9 （V+V）（5.2.2） c) 进样量：2 μL； d) 柱温：35 ℃； e) 流速：0.2 mL/min。 8.2.2 质谱条件 a) 离子源：电喷雾电离源（ESI）； b) 扫描方式：正离子扫描； c) 检测方式：多反应监测（MRM）； d) 离子源温度：550 ℃； e) 气帘气：35 psi； f) 离子喷雾电压：5500 V； g) 定性离子对、定量离子对、去簇电压和碰撞能见表1。 8.2.3 定性确证 按照仪器参考条件测定试样溶液和标准工作溶液，试样中的γ—氨基丁酸质量色谱峰保留时间与标准工作溶液一致（变化范围在±2.5 % 之内）；且试样中γ—氨基丁酸的两个子离子的相对丰度比（k）与浓度相当标准工作溶液中γ—氨基丁酸的两个子离子的相对丰度比相比，其允许偏差不超过表2 规定的范围，则可判定为试样中存在γ—氨基丁酸。γ—氨基丁酸标准溶液质量色谱图参见附录A。 允许的最大偏差 ± 20 ± 25 ± 30 ± 50 8.2.4 定量测定 将标准系列工作溶液按仪器参考条件进行测定，得到相应的标准系列工作溶液的质量色谱峰面积。以标准系列工作溶液的浓度为横坐标，以质量色谱峰的峰面积为纵坐标，绘制工作曲线，保证样品中γ—氨基丁酸浓度在标准曲线范围内，外标法定量。 9 结果计算 试样中γ—氨基丁酸的含量按式（1）计算。 |
| 是否包含专利信息 | 是 |
| 标准文本 | 查看 |
| 团体详细信息 | |||
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| 团体名称 | 中国粮食商业协会 | ||
| 登记证号 | 511000005000158151 | 发证机关 | 中华人民共和国民政部 |
| 业务范围 | 行业自律，信息交流，业务培训，国际合作，咨询服务。 | ||
| 法定代表人/负责人 | 孙豹 | ||
| 依托单位名称 | 中粮贸易有限公司 | ||
| 通讯地址 | 北京市东城区建国门内大街8号中粮广场A座8层 | 邮编 : 100000 | |