T_NXXH 009—2024 精液稀释技术规程-团体标准

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标准详细信息
标准状态  现行
标准编号  T/NXXH 009—2024
中文标题  精液稀释技术规程
英文标题  Technical specification for semen dilution
国际标准分类号  65.020.30 动物饲养和繁殖
中国标准分类号  
国民经济分类  A031 牲畜饲养
发布日期  2024年02月28日
实施日期  2024年03月07日
起草人  苏日娜、刘百川、王桂桃、王娜、张荣、何云梅、周晋尧、薛彦伦、巴音娜、刘平、德布信吉雅
起草单位  鄂托克旗品牌促进服务中心、内蒙古牧之源农牧业投资有限责任公司、内蒙古夏禾标准化技术服务有限公司、内蒙古亿维白绒山羊有限责任公司、鄂托克旗动物疫病预防控制中心、鄂托克旗农牧技术推广中心、鄂尔多斯市检验检测中心、鄂托克旗农畜产品产业协会
范围  本文件规定了精液稀释技术的稀释保护液配制、稀释方法、稀释比例及降温与平衡。 本文件适用于精液的稀释
主要技术内容  3 术语和定义.
本文件没有需要界定的术语和定义。
4 稀释保护液配制
配制要求
配制冻精用的稀释保护液,应使用双重蒸馏水、新鲜的卵黄和化学分析纯试剂等,所用器具保证清洁、干燥、无菌。
所有稀释溶液(除卵黄外)都必须经过滤后并在水浴中煮沸消毒,冷却至35 ℃~38 ℃ ,再加卵黄和抗菌素,甘油单独水浴蒸煮消毒30 min~45 min 。
配制好的稀释液应做好标记,并将三角瓶口盖用硅胶塞封好后放入4.0℃ 的冰箱冷藏。
稀释保护剂必须现用现配。
配制
所有器具应洁净并消毒灭菌。
所用化学试剂(化学纯以上);柠檬酸三钠、果糖、蔗糖、乳糖、甘油,鸡蛋用健康鸡场的新鲜鸡蛋,双蒸水。
稀释液按照以下规定操作:
a)基础液:柠檬酸钠1.5 g、葡萄糖3.0 g、乳糖5.0 g、加蒸储水至100.0 mL、消毒待用。
b)稀释液:取消毒后的基础液75.0 mL,卵黄20.0 mL,甘油5.0 mL。
c)所有稀释液每100.0 mL中添加青霉素、链霉素各10万单位,现配现用。
5 稀释与分装
5.1 —次稀释法
将需加的稀释液一次性加完。
二次稀释法
将所加稀释液分为两次添加,首先加入不含甘油的一液,加至稀释总量的一半,降温、平衡后再加足含有甘油的二液。
添加与精液等温的稀释液时应缓缓加入,经两次稀释后甘油总量4 mL/100 mL~6 mL/100 mL为宜。
细管精液的分装
细管为无毒、耐低温的专用塑料管。
平衡前在室温下或平衡后在3 ℃~5 ℃环境下均可分装,管内需留一定的空隙。
分装后两端封口应严密。
微型分装管的精液量小于0.18 mL,中型管小于0.40 mL。
稀释比例:
根据原精液密度和活力确定稀释倍数,稀释比例以1:1~1:5为宜,确保每一剂量冻精的有效精子数能达到1500 万。
6 降温与平衡
时间
稀释后的精液在30 ℃~35 ℃ 范围采用逐渐降温法,在1 h~2 h 内使稀释后的精液温度降至4 ℃,并在恒温容器内平衡2 h~4 h 。
降温
精液稀释后经1 h左右逐步降温至3 °C~5 °C。 
平衡
时间为3 h~4 h。
注意事项
制备细管冻精的操作室应清洁干净,易于消毒并具有消毒设施,操作人员必须严格遵守实验室着装要求进行无菌操作,严格禁止异味存在(酒昧、烟味)。
降温平衡后精液在封装打印前,匀速充分混匀,并检查冻前精子活力。
是否包含专利信息  
标准文本  不公开
团体详细信息
团体名称鄂托克旗农畜产品产业协会
登记证号51150624MJY644587X发证机关鄂托克旗民政局
业务范围鄂托克旗地理标志的建设和对农畜产品、水产品及以其为原料的加工产品的技术服务,品质管理及宣传推广等。
法定代表人/负责人刘欢
依托单位名称
通讯地址内蒙古自治区鄂尔多斯市鄂托克旗乌兰镇原公安局大门东4号底商邮编 : 016100

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