T_GDFCA 110—2025 食品中致病菌快速检测方法 荧光PCR法-团体标准
目录
| 标准详细信息 | |
|---|---|
| 标准状态 | 现行 |
| 标准编号 | T/GDFCA 110—2025 |
| 中文标题 | 食品中致病菌快速检测方法 荧光PCR法 |
| 英文标题 | Rapid determination of pathogens for foods— Real-time PCR method |
| 国际标准分类号 | 67.050 |
| 中国标准分类号 | X 04 |
| 国民经济分类 | M731 自然科学研究和试验发展 |
| 发布日期 | 2025年08月01日 |
| 实施日期 | 2025年08月01日 |
| 起草人 | 熊槐、庞恩、赵彦远、王国权、张佳佳、文钰、鞠芬、丛枫、李颖、杨道红、严烨、刘航、 叶映朵、陈数、叶俊杰、陈雅君、吴经纬、谭国慧、庞玉樱、罗雯诗、潘敏尧、林钦恒、谢钦杰、杜晓方、 陈敏儿、丁清龙、周露、束浩然、谢汝祝、桂昊、王晶、陈秀云、吴学贵、王一晨、陈木华、马婷、刘嘉敏、陈德斌、赖炳权、许少飞、郭燕华、聂炎炎、赖翠玲、冯小清、陈婕、葛秀军、 黄承熙、杨翠琪、吴学、苏新国、周宜洁、张倩、李文全。 |
| 起草单位 | 广州康泽生物技术有限公司、广东省食品检验所（广东省酒类检测中心）、绿色链（广东）检测科技有限公司、广东省科学院测试分析研究所（中国广州分析测试中心）、通标标准技术服务有限公司广州分公司、广州市华测检测认证技术有限公司、广电计量检测集团股份有限公司、广州质量监督检测研究院、绿色链（广东）科技研究院（有限合伙）、华谱（西安）生物科技有限公司、方舟生物安全科技（广州）有限公司、深圳市沃特虹彩检测技术有限公司、广州金至检测技术有限公司、广州华生检测技术服务有限公司、海南威尔检测技术有限公司、广州誉翔科技有限公司、深圳中检联检测有限公司、广州华鑫检测技术有限公司、广东永诺医疗科技有限公司、广东省科学院微生物研究所（广东省微生物分析检测中心）、广州南沙明曦检测服务有限公司、广州市朴朴网络科技有限公司、 广州东川新街市有限公司、广东农工商职业技术学院、广东理工学院。 |
| 范围 | 本文件描述了食品中沙门氏菌、志贺氏菌、副溶血性弧菌、小肠结肠耶尔森氏菌、空肠弯曲菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、肠出血性大肠埃希氏菌O157:H7、创伤弧菌、霍乱弧菌、铜绿假单胞菌的荧光PCR定性检测方法。 本文件适用于食品中沙门氏菌（Salmonella spp.）、志贺氏菌（Shigella spp.）、副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）、小肠结肠耶尔森氏菌（Yersinia enterocolitica）、空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、单核细胞增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes)、肠出血性大肠埃希氏菌O157:H7（Escherichia coli O157:H7）、创伤弧菌（Vibrio vulnificus）、霍乱弧菌（Vibrio cholerae）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）的荧光PCR快速定性检测。 |
| 主要技术内容 | 确定标准主要内容的论据： 1. 适用范围：综合考虑荧光 PCR 技术的特点和食品检测的实际需求，明确标准适用于各类食品中常见致病菌的快速检测。参考国内外相关标准对食品种类和致病菌范围的界定，确保本标准覆盖范围全面且合理。 2. 技术原理：基于荧光 PCR 技术的基本原理，即通过荧光信号实时监测 PCR 扩增过程，对目标致病菌的特定基因进行检测。详细阐述该技术在食品致病菌检测中的应用原理，为检测方法的实施提供理论依据。 3. 检测流程：包括样品制备、核酸提取、荧光 PCR 反应体系配置、反应条件设置以及结果判定等环节。通过实验验证和参考相关文献，确定每个环节的最佳操作条件和技术参数。如在核酸提取环节，对比不同提取方法对不同食品基质中致病菌核酸提取效率的影响，选择最适宜的提取方法；在反应体系配置和反应条件设置方面，优化引物、探针浓度以及退火温度等参数，以提高检测的灵敏度和特异性。 4. 质量控制：参考 GB 4789.45-2023《食品安全国家标准 微生物检验方法验证通则》等标准中关于方法验证和质量控制的要求，设置内部对照、阳性对照和阴性对照，对检测过程进行质量监控。同时规定了重复性和再现性要求，确保检测结果的可靠性和准确性。重复性要求在相同实验条件下，同一检测人员对同一样品进行多次检测，结果应符合一定的偏差范围；再现性要求不同检测人员在不同实验室对同一样品进行检测，结果也应具有可比性。 标准主要内容： 本标准包含范围、规范性引用文件、术语和定义、缩略语、测定原理、试剂耗材、仪器设备、样品前处理、反应步骤及附录等部分。 |
| 是否包含专利信息 | 否 |
| 标准文本 | 不公开 |
| 团体详细信息 | |||
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| 团体名称 | 广东省食品流通协会 | ||
| 登记证号 | 51440000093230234F | 发证机关 | 广东省民政厅 |
| 业务范围 | 举办论坛，考察交流，咨询服务，编辑刊物，开办网站，接受政府相关政策的调研及委托授权等。 | ||
| 法定代表人/负责人 | 梁康桂 | ||
| 依托单位名称 | 广东省人民政府相关职能部门 | ||
| 通讯地址 | 广州市海珠区江海大道10号生物工程大厦1113室 | 邮编 : 510300 | |